Konfokálny STED mikroskop je používaný najmä pre zobrazenie špecifických častí buniek, ako napr. povrchová membrána, značené proteíny a podobne, s vysokým rozlíšením (100 nm). Biely excitačný laser a tri deplečné lasery umožňujú využitie širšieho spektra fluorescenčných značiek a multiplexné farbenie, 405 nm laser k tomu pridáva možnosť použitia štvrtej značky pre jadro a tiež fotokonverziu špecifických prób. Tento mikroskop je možné využívať aj na štandardnú konfokálnu mikroskopiu, a to s ešte širším spektrom využiteľných fluorescenčných prób než pri technike STED. Kvalitu získaných obrazov podstatne zvyšuje tzv. gating, ktorý vďaka pulznému laseru a hybridným detektorom odstraňuje veľkú časť nešpecifického svetla (odraz, rozptýlenie).
Tandemový skener umožňuje meranie 3D (xyt) a 4D (xyzt) lokálnych vápnikových signálov pomocou vápnikových indikátorov, ale aj iné techniky náročné na rýchlosť. Príkladom môže byť spektrálne oddelenie v 3D vzorkách a zobrazenie excitačno-emisných spektier vzorky.
Kontakt: Mgr. Zuzana Ševčíková Tomášková, PhD.
Vybudované s podporou projektu: ITMS 26230120006
Zostava STED mikroskopu Leica TCM SP8 STED 3X:
- invertovaný mikroskop DMi8
- AOBS
- Štandardné objektívy 63x vodný a olejový, špeciálny objektív STED WHITE 100x
- Tandem skener 8 kHz
- 2x HyD, 2x PMT, 1x TLD detektory
- Gated STED , 3D STED
- SuperZ galvo pre rýchle 3D zobrazovanie
- Laser 405 nm
- Pulzný biely laser WLL2 – 470 – 670 nm
- Laserové vyčerpávanie pre STED: 592 nm, 660 nm, pulzný laser 775 nm